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2021-01-07
乙型流感病毒(IBV)核酸检测星空体育莱切反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:①引物长度:15-30bp,常用为20bp左右。②引物扩增跨度:以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。③引物碱基...2021-01-06
大鼠神经营养因子3(NT-3)elisa星空体育莱切实验材料与试剂配制:1.仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。2.缓冲液使用:加5ul的缓冲液于50ul的样品中,如果样品量不够或者不确定,缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。混匀,静置1小时备用(如果标本是血清或者血浆,此步骤忽略)。3.洗液的配制:按1:100的比例配制洗液备用。注意事项:1.实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。2.加样:加样时,要控制加样速度,避免...2021-01-05
猪内源性逆转录病毒RT-LAMP星空体育莱切注意事项:1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。4.PCR试剂配制应使用高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间...2020-12-30
大鼠CD30分子(CD30)ELISA星空体育莱切操作流程:1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水...2020-12-28
鸡1,3-βD葡葡糖苷酶ELISA星空体育莱切标本收集:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。1)血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2)血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。3)尿液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-...2020-12-24
人可溶性CD30配体(sCD30L)elisa检测星空体育莱切注意事项:1.星空体育莱切从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值)...2020-12-23
白介素27ELISA星空体育莱切应用双抗体夹心法测定标本中人白介素6(IL-6)水平。用纯化的人白介素6(IL-6)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白介素6(IL-6),再与HRP标记的白介素6(IL-6)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素6(IL-6)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品...